@Kirikkayis: Was ist denn das Kriterium? Oder ist einfach die vorletzte zusammenhängende Ziffernfolge ausreichend? Dann such einfach nach Ziffernfolgen und nimm über einen negativen Index die vorletzte:
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In [54]: text
Out[54]: '#test x y z\n#text hehashasd\n#hallo beispieltext Umdrehung 600 1/min'
In [55]: re.findall(r'\d+', text)
Out[55]: ['600', '1']
In [56]: re.findall(r'\d+', text)[-2]
Out[56]: '600'
`x` und `y` sind keine guten Namen weil nichtssagend, `datei` ist kein guter Name weil irreführend. Da würde man ein Dateiobjekt erwarten und keinen CSV-Reader. Wenn man nur an einen Wert in der dritten Zeile kommen möchte, ist das komplette einlesen eventuell auch etwas übertrieben.
@Sirius: Ich hatte das schon so verstanden das es eine CSV-Datei ist, denn ich habe die drei Zeilen als Inhalt dieser *einen* Zelle aufgefasst. Wenn das keine CSV-Datei ist, geht das ja nicht.